Ферменты Выбраны параметры: Thermo FS

10x буфер B (Blue) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Буфер G (Green) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 50 мМ NaCl 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

10X буфер GeneAmp PCR Gold оптимизирован для использования с ДНК-полимеразой AmpliTaq Gold и ДНК-полимеразой AmpliTaq Gold LD.

Буфер GeneAmp PCR Gold не содержит в своем составе ионы магния. Буфер поставляется в комплекте с раствором MgCl₂. Совместное использование буфера GeneAmp 10X PCR Gold и раствора MgCl₂ обеспечивает большую универсальность в оптимизации концентрации ионов магния для достижения оптимальных условий для ПЦР с любым специфическим набором праймеров и ДНК-матрицы.

Список компонентов:

• буфер GeneAmp PCR Gold, 10X: 150 мМ Tris-HCl, рН 8.0; 500 мМ KCl;
• раствор 25 мМ MgCl₂;
• все растворы приготовлены на автоклавированной, деионизированной, ультрафильтрованной воде.

Буфер O (Orange) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (50 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 100 мМ NaCl, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Буфер R (Red) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 at 37 °C), 10 мМ MgCl₂ , 100 мМ KCl, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Буфер Tango (yellow) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Буфер танго был разработан для проведения реакции двойного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции.

Концентрация	10x
Состав	1x (33 мМ трис-ацетат (рН 7,9 при 37 °С), 10 мМ ацетат магния, 66 мМ ацетат калия, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp I. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp II и раствором MgCl2.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp II и раствором MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp I.

Условия хранения: -20^оС

Термостабильная ДНК-полимераза DreamTaq представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью. ДНК-полимераза DreamTaq требует тех же условий постановки и проведения реакции амплификации, что и обычная Taq ДНК-полимераза.

Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Green.

ДНК-полимераза DreamTaq способна синтезировать более длинные последовательности (по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой) – до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусных ДНК – до 20 тыс. пар нуклеотидов.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах.
Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусной ДНК – до 20 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения продуктов ПЦР на гель без добавления специальных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 5 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

• 20 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 20 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 40 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start Green представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, а также утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Hot Start Green.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления дополнительных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В набор входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq Hot Start.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза DreamTaq представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью. ДНК-полимераза DreamTaq требует тех же условий постановки и проведения реакции амплификации, что и обычная Taq ДНК-полимераза.

Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq.

ДНК-полимераза DreamTaq способна синтезировать более длинные последовательности (по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой) — до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусных ДНК — до 20 тыс. пар нуклеотидов. ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой;
• способность синтеза более длинных ампликонов — до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
• ДНК-полимераза DreamTaq — 40 мкл (5 Ед/мкл);
• 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) — 1,25 мл.
• 500 единиц:
• ДНК-полимераза DreamTaq — 100 мкл (5 Ед/мкл);
• 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) — 2 × 1,25 мл.
• 5 × 500 единиц:
• ДНК-полимераза DreamTaq — 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
• 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) — 10 × 1,25 мл.
• 10 × 500 единиц:
• ДНК-полимераза DreamTaq — 10 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
• 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) — 20 × 1,25 мл.
• 20 × 500 единиц:
• ДНК-полимераза DreamTaq — 20 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
• 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) — 40 × 1,25 мл.

Условия хранения — от -5 °С до -30 °С.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокпроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Наборы Phusion Green Hot Start II комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Green Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления специальных реагентов для электрофореза.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Наборы Phusion Green комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР).

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion Hot Start II (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,5 мМ MgCl₂.

ДНК-полимераза Phusion Plus Thermo FS представляет собой высокоточную ДНК-полимеразу, которая имеет очень низкую частоту ошибок, быструю скорость элонгации и высокую устойчивость к ингибиторам. Частота ошибок у Phusion Plus ДНК-полимеразы более чем в 100 раз ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов, например, таких как ксилан, гуминовая кислота, гемин.

Новый реакционный буфер Phusion Plus включает запатентованные добавки, которые стабилизируют дуплексы праймера/матрицы во время стадии отжига при 60 °C. Эта уникальная буферная композиция повышает специфичность ПЦР без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров, помогая экономить время и избегать ошибок при выполнении ПЦР. Кроме того, при проведении ПЦР с помощью ДНК-полимеразы Phusion Plus есть возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины с использованием одного и того же протокола.

ДНК-полимераза Phusion Plus неактивна при комнатной температуре благодаря ее механизму горячего старта, опосредованному молекулами Affibody, что позволяет проводить подготовку реакционной смеси при комнатной температуре. Активность фермента полностью восстанавливается после начальной стадии денатурации.

ДНК-полимераза Phusion Plus идеальна для применений, где важна точность, таких как клонирование, секвенирование, сайт-направленный мутагенез.

Преимущества Phusion Plus ДНК-полимеразы:

• в 100 раз большая точность синтеза, чем у Taq ДНК-полимеразы;
• универсальная температура отжига 60 °C;
• повышенная специфичность — механизм горячего старта снижает неспецифическую амплификацию и деградацию праймеров;
• высокая устойчивость к ингибиторам — работает с ДНК неоптимальной чистоты;
• обладает 5' →3' ДНК-полимеразной активностью;
• обладает 3' →5' экзонуклеазной активностью;
• обнаруживает мишени из 0,08 нг геномной ДНК человека;
• амплифицирует ПЦР-продукты с тупыми концами;
• возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины;
• амплифицирует до 10 тыс. п.о. геномной ДНК и до 20 тыс. п.о. фрагментов ДНК низкой сложности;
• работает как с AT, так и с GC богатыми мишенями (GC Phusion enhancer обеспечивает синтез мишений с содержанием GC более 65%);
• обладает скоростью синтеза 15-30 сек/kb.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для севенирования;
• синтез GC-богатых участков ДНК;
• амплификация длинных фрагментов (до 20 тыс. п.о.);
• сайт-специфический ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР.

Условия хранения — 20°С.